以無血清培養 pcMSCs 展現樣態
人類胎盤的絨毛膜基質分離出的間質幹細胞（pcMSCs）在無血清培養基中的培養顯示了其顯著的潛力。這些 pcMSCs 能夠在無血清的定義培養基中生長，並且在附著後展現出典型的成纖維細胞形態，如圖所示。這種無血清培養方法有助於細胞保持其幹細胞特性，同時避免了血清中的異源物質對細胞分化的干擾。正因為無血清培養提供了一個更為純淨的環境，pcMSCs 在分化潛能和遺傳穩定性方面均表現出優異的特性。這一優勢為未來的細胞治療和組織工程應用奠定了堅實的基礎。
圖： 無血清培養物中的 pcMSCs，顯示紡錘形形態。
比例尺：100μm。
確認來源母體絨毛膜的身份和純度
證實細胞來源於母體：XX 染色體組合指示這些細胞來自女性（母體），因為女性的細胞有兩條 X 染色體而沒有 Y 染色體。這證實了這些間葉幹細胞（pcMSCs）來源於胎盤的母體部分，即基底絨毛膜，而不是來自胎兒部分。
性別無關的細胞來源：由於這些細胞僅顯示 XX 染色體組合，這意味著它們來自胎盤的母體部分，不受新生兒性別的影響。這表明這些細胞的來源與胎兒的性別無關，強調了其來源的穩定性和一致性。
排除胎兒來源的可能性：這些結果排除了細胞來自胎兒的可能性，因為胎兒細胞會顯示 XY 染色體組合（男胎）或 XX 染色體組合（女胎）。在這個研究中，未檢測到 Y 染色體，證明這些細胞不是來自胎兒，而是母體的細胞。
細胞身份的確認：確認細胞來源於母體部分對於研究的準確性和可靠性非常重要。這樣的確認有助於確保所使用的細胞具有一致的來源和特徵，對於後續的應用和研究是有意義的。
上圖 ：FISH 分析顯示從男性新生兒胎盤分離出的幹細胞。X 染色體顯示為紅色，細胞核顯示為藍色。放大圖顯示每個細胞核內有兩個 X 染色體。比例尺：50 μm。
下圖：pcMSCs 的 FISH 分析。X 和 Y 染色體分別顯示為紅色和綠色信號，細胞核以 DAPI 染色呈藍色。人類臍靜脈內皮細胞（HUVECs）作為對照，顯示 X 和 Y 染色體均為雙陽性，而 pcMSCs 在相同的細胞核中僅顯示 X 染色體，未檢測到 Y 染色體。圖中左下角的放大視圖為各個面板中白色方框內影像的放大版本。比例尺：50 μm。
無血清培養 20 代無異常染色體的 pcMSCs 穩定性
本研究確認了 pcMSCs 是來自胎盤的母體部分（基底蜕膜），並進行了細胞穩定性的深入分析。無論新生兒的性別如何，這些細胞均在無血清培養條件下傳代達 20 次，期間未觀察到任何異常染色體。這一結果強烈表明 pcMSCs 在無血清環境下具有高度穩定性，適合於長期研究和臨床應用。
圖： 顯示了 pcMSCs 的核型染色體分析結果（n = 3），所有三個 pcMSC 樣本中僅檢測到 X 染色體，進一步證實了細胞的穩定性和純度。
高度純化的證據
超過 95% 的 pcMSCs 表現 CD29、CD44、CD73 和 CD90
在本研究中，對於 pcMSCs (perinatal stem cells) 進行了詳細的免疫表型分析，結果顯示超過 95% 的細胞表現了 CD29、CD44、CD73 和 CD90 這四種幹細胞表面標記。這一觀察結果提供了以下幾點重要意義：
高純度：超過 95% 的細胞顯示這些關鍵的幹細胞標記，顯示該細胞群體經過有效的純化過程。這種高純度的結果表明，所得到的細胞群體大部分為多能幹細胞，而非其他類型的細胞，證明了純化方法的成功。
多能性與自我更新能力：CD29、CD44、CD73 和 CD90 是與幹細胞功能密切相關的表面標記。它們的高表現通常與細胞的多能性（分化成多種細胞類型的能力）和自我更新能力相符。這表明所研究的 pcMSCs 在保持其幹細胞特性方面具有優良的狀態。
低污染風險：在本次分析中，其他非幹細胞標記（如 CD14、CD34、CD45 和 HLA-DR）表現為低於 2%，顯示細胞群體的污染程度極低，進一步支持了細胞的高純度。
圖： 分析中，CD29、CD44、CD73、CD90的表現強度用"++"表示，而CD14、CD34、CD45、HLA-DR的表現則為"––"，控制組以黑色顯示，實驗組以綠色顯示。這有助於可視化比較各組之間的細胞標記表現。
pcMSCs 細胞分化能力的展示
pcMSCs（胎盤間充質幹細胞）的多能分化潛力，證明這些細胞在體外環境下具有出色的分化能力。在實驗中，pcMSCs 被誘導分化為三種不同的細胞類型：成骨細胞、軟骨細胞 和 脂肪細胞。為了確認這些分化過程的成功，研究人員使用了特定的染色技術。
成骨分化:使用 Alizarin Red S 染色，顯示出鈣化沉積，表明細胞已成功分化為成骨細胞。
軟骨分化: 使用 Alcian Blue 染色，檢測到糖胺聚醣的存在，這是軟骨細胞的主要成分，證實了軟骨分化的成功。
脂肪分化:使用 Oil Red O 染色，顯示出脂質堆積，表明細胞已成功分化為脂肪細胞。
這些結果的陽性信號表明 pcMSCs 具備廣泛的分化能力，這對於細胞治療和再生醫學的潛在應用具有重大意義。
圖： pcMSCs 的體外分化能力展示。圖 (1) 和 (2) 顯示成骨分化結果，(3) 和 (4) 顯示軟骨分化結果，(5) 和 (6) 顯示脂肪分化結果。圖中的 (1)、(3) 和 (5) 是對照組結果，顯示未經誘導分化的細胞狀態。比例尺：200 μm。
